正確的鑒定病原生物與統(tǒng)計(jì)其寄生強(qiáng)度是診斷魚類寄生蟲病和采取相應(yīng)措施的重要依據(jù)。其方法如下述。
一、檢查病魚應(yīng)注意的事項(xiàng)
1.作檢查診斷的病魚要采用活魚或剛死不久的，否則會(huì)因魚死后太久，而使某些癥狀消失或體表的病原體死亡或病原體離開宿主而無(wú)法鑒別，影響診斷結(jié)果的可靠性、正確性；
2.檢查過(guò)程中要保持魚體表面的濕潤(rùn)。因魚體一經(jīng)干燥，部分病征就自行消失，病原難于識(shí)別。取樣時(shí)標(biāo)本（待檢病魚）應(yīng)放在盛水的桶中，如路較遠(yuǎn)，病魚應(yīng)用濕布或濕紙包裹，以防干燥；
3.檢查時(shí)，分離器官應(yīng)力保各器官的完整性，并分別放置，特別要注意，切莫讓各器官之病原相互污染，并保持濕潤(rùn)，防止干燥；
4.所有用具要洗凈，防其相互污染，影響檢查結(jié)果。檢查應(yīng)按一定的順序進(jìn)行，否則會(huì)發(fā)生忙亂或遺漏。遇一時(shí)不能肯定的病原或病變的材料應(yīng)留下標(biāo)本，以備進(jìn)一步研究。
二、檢查方法
1.現(xiàn)場(chǎng)觀察 在條件許可的情況下應(yīng)察看現(xiàn)場(chǎng)，測(cè)量池中的水溫及pH值，察看水色、水源和塘面及魚群的活動(dòng)與死魚的情況，了解發(fā)病的經(jīng)過(guò)及已采取的措施等。詳細(xì)記錄以備作為確診時(shí)參考之用；
2.肉眼檢查 魚類的寄生蟲病有時(shí)會(huì)在有關(guān)部位出現(xiàn)一定的病理變化，呈現(xiàn)出癥狀，有時(shí)癥狀清楚，可用肉眼作現(xiàn)場(chǎng)初步診斷。但有時(shí)有些病并無(wú)特殊明顯的癥狀，或由于病原體細(xì)小或隱藏于組織器官中，肉眼難于查看。因此，凡有條件者應(yīng)進(jìn)行鏡檢，以保診斷之準(zhǔn)確；
3.鏡檢 即是利用顯微鏡或解剖鏡進(jìn)行檢查。主要采用水浸片法、壓片法和涂片法三種方法。
水浸片是最常用的一種。取一點(diǎn)受檢的組織，如鰓絲、體表潰瘍處、消化道的內(nèi)含物、體表附著物或粘液等于載玻片上，加上一滴清水（或海水）用鑷子將組織分散，加上蓋玻片，稍加壓平，即可觀察。受檢組織不能放置于玻片上太多、太厚和互相重疊。
壓片法是用一些柔軟組織，如肝胰臟、肌肉、心臟、腸壁等進(jìn)行檢查。取一點(diǎn)組織一小塊于玻片上，輕輕蓋上另一載玻片，輕壓令受檢組織壓成一透明薄片，即可觀察，無(wú)需加水。亦可用蓋玻片加壓，做成血片檢查。
涂片法適用于粘液性樣品的檢查，如血液，蝦類肝胰細(xì)胞中病毒包涵體檢查。
用于檢查的病魚應(yīng)有一定的數(shù)量，以保證結(jié)果的代表性和可靠性，有條件時(shí)應(yīng)檢查3~10尾。
三、檢查步驟
檢查病魚時(shí)，需按一定步驟順序進(jìn)行，一般先體外，后體內(nèi)。各器官的順序先后如下：⑴ 粘液、⑵ 鰭、⑶ 鼻腔、⑷ 血液、⑸ 鰓、⑹ 口腔、⑺ 脂肪組織、⑻ 胃腸、⑼ 肝、⑽ 脾、⑾ 膽囊、⑿ 心臟、⒀ 鰾、⒁ 腎、⒂ 膀胱、⒃ 性腺、⒄ 眼、⒅ 腦、⒆ 脊髓、⒇ 肌肉。
（一）肉眼檢查病魚體表
1.將病魚放在解剖盤上，首先注意其體色及肥瘦情況；體表粘液之多少或鰭條上有無(wú)小白點(diǎn)并與粘液相伴呈米粉狀樣結(jié)構(gòu)；有無(wú)明顯病癥出現(xiàn)，如有無(wú)白色瘤狀物或細(xì)小白點(diǎn)、有無(wú)突出的“紅點(diǎn)”、有無(wú)炎癥出現(xiàn)、鱗片下有無(wú)“花紋”存在、有無(wú)“黑點(diǎn)”；或肉眼可見之寄生蟲的存在；頭背面有無(wú)充血等種種異常現(xiàn)象的出現(xiàn)。
2.體表檢查之后，將鰓蓋掀起，注意鰓之色澤，粘液之多少，有無(wú)白點(diǎn)、瘤塊之存在，鰓有無(wú)腫大，鰓絲末端是否腫大發(fā)白及是否有異物存在，鰓蓋是否外翻等變化。并注意鰭的非正常改變。
（二）鏡檢有關(guān)器官
肉眼外表檢查之后，進(jìn)入解剖檢查。由于病魚的發(fā)病部位，一般常見于皮膚、鰓及腸道，故主要介紹這三個(gè)部位，余者請(qǐng)參照上述進(jìn)行。
1.粘液
在魚類的體表，除肉眼檢查時(shí)可見的寄生蟲外，往往還有許多肉眼看不見的寄生蟲，例如口絲蟲、顫動(dòng)隱鞭蟲、粘孢子蟲、小瓜蟲、車輪蟲、三代蟲以及吸蟲囊蚴等。檢查的方法是用解剖鑷刮取體表的粘液，加上蓋玻片，進(jìn)行觀察。
2.鰓
檢查鰓時(shí)，先用剪刀將左右兩邊的鰓完整地取出，放在培養(yǎng)皿里。首先仔細(xì)觀察鰓上有無(wú)肉眼可見的寄生蟲，再看色澤如何；然后，用小剪刀剪取小塊鰓組織，放在載玻片上，加上少量清水，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下檢查。鰓瓣是特別容易被寄生蟲侵害的器官，如各類原生動(dòng)物、單殖類、復(fù)殖類吸蟲的囊蚴、蛭類、軟體動(dòng)物寄生幼蟲、甲殼類等，在鰓上往往都可以找到。檢查時(shí)，每邊鰓的第一片鰓片接近兩端的位置剪取一小塊鰓絲，因?yàn)檫@個(gè)地方寄生蟲較集中。
檢查小型寄生蟲后，可把整個(gè)鰓放在培養(yǎng)皿里，加入清水（淡水或海水），將鰓小片逐片剪開，在解剖鏡下觀察。觀察時(shí)，用兩根解剖針，把鰓絲逐條拉開，仔細(xì)檢查，或用鑷子將每片鰓片的鰓上所有內(nèi)含物完全刮下，放在培養(yǎng)皿里，用清水稀釋、攪勻后，在解剖鏡或低倍顯微鏡下進(jìn)行檢查。也可用清水洗滌數(shù)次，倒棄上清液，檢查單殖類。
3.腸道
檢查腸胃時(shí)，首先要把腸的外壁上的脂肪組織，盡量除干凈，否則脂肪會(huì)混進(jìn)腸的內(nèi)含物，而妨礙觀察。除凈脂肪組織后，將腸管前后拉長(zhǎng)，擺在解剖盤上。先用肉眼檢查，看腸外壁有無(wú)白點(diǎn)，這些白點(diǎn)通常是粘孢子蟲或微孢子蟲的孢囊。
肉眼檢查完后，一般分段檢查（分前、中、后三段），取腸內(nèi)含物進(jìn)行鏡檢，每段檢查兩片，常可見到各類寄生物，如各種原生動(dòng)物、蠕蟲。
鏡檢后，將腸管剪開，如果發(fā)現(xiàn)大型寄生蟲，就先行取出，放在培養(yǎng)皿中，并注意腸管是否有潰爛、發(fā)紅發(fā)紫、或有無(wú)白點(diǎn)等變化。最后再用壓片法，檢查腸管。同時(shí)在作壓片法檢查之前應(yīng)將腸的內(nèi)含物都刮下來(lái)，放在培養(yǎng)皿里，加入生理鹽水沖洗攪勻，再檢查吸蟲之類寄生蟲存在與否。
四、魚病的診斷
（一）魚病的診斷
魚病診斷的目的在于通過(guò)觀察、檢查、分析，對(duì)病魚所患疾病，作出正確的判斷，以便對(duì)癥下藥，采取合理措施。
1.見到病魚后，先用肉眼觀察，注意那里有病變、病變程度等有關(guān)情況，什么病變是主要的，這樣大致就可初步確定魚患什么病。
如果病魚所出現(xiàn)的病癥不明顯，或單憑肉眼無(wú)法確定的疾病，應(yīng)進(jìn)行鏡檢。依據(jù)病魚所呈現(xiàn)的變化，結(jié)合病原檢查（包括病原體及寄生強(qiáng)度），與肉眼檢查相互配合，使初步診斷更有科學(xué)依據(jù)，更準(zhǔn)確。
2.注意魚池的各種條件，如水溫、水質(zhì)、含氧量、pH值；注意以往魚病流行情況；注意飼養(yǎng)管理情況，包括清塘、放養(yǎng)密度、投喂情況、防病情況，以及發(fā)病前后的有關(guān)變化。
3.依據(jù)檢查結(jié)果，進(jìn)行分析研究，作出診斷，采取相應(yīng)措施。
（二）病原體的計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)
在寄生蟲病的診斷過(guò)程中，除確定寄生蟲的種類外，還要判斷病原體的數(shù)量，因不是有病原存在就能引起魚病，而是需寄生數(shù)量達(dá)到一定的強(qiáng)度時(shí)才能致病的，所以相對(duì)準(zhǔn)確的估計(jì)病原體數(shù)量是重要的，否則會(huì)產(chǎn)生誤診。但具體計(jì)算中有一定的困難，如原生動(dòng)物，肉眼難于看到，即使在顯微鏡下，也不能把所有的病原體逐個(gè)數(shù)清，只能采用估計(jì)法。估計(jì)法雖然不可能做到十分準(zhǔn)確，但終究還有一個(gè)數(shù)字可憑，否則進(jìn)行材料總結(jié)時(shí)，就無(wú)法說(shuō)明該地區(qū)各種魚病的危害流行情況。一般采用下列標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)：
1.記數(shù)符號(hào)用“+”表示
“+”表示有；“++”表示多；“+++”表示很多。
2.各種病原體的計(jì)數(shù)
鞭毛蟲、變形蟲、球蟲、粘孢子蟲、微孢子蟲、單孢子蟲在高倍顯微鏡視野下，約有1~20個(gè)以下的蟲體或孢子時(shí)記“+”，21~50個(gè)時(shí)記“++”，51個(gè)以上時(shí)記“+++”。
纖毛蟲及毛管蟲，在低倍顯微鏡視野下有1~20個(gè)記“+”，21~50個(gè)記“++”，51個(gè)以上的蟲體記“+++”。小瓜蟲除按上面標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算蟲體外，如計(jì)算囊胞時(shí)，則用數(shù)字說(shuō)明。
單殖吸蟲、線蟲、絳蟲、棘頭蟲、蛭類、甲殼動(dòng)物、軟體動(dòng)物的幼蟲，在50個(gè)以下以數(shù)字說(shuō)明，50個(gè)以上者，則說(shuō)明估計(jì)數(shù)字。
（附：按目鏡為10×；蟲體數(shù)為同一片中3個(gè)視野的平均數(shù)。）
在一般情況下，打上“++”的就開始少量死魚，這時(shí)在生產(chǎn)上就必需立即采取適宜的措施進(jìn)行治療，否則可能會(huì)引起病魚大量死亡。所以劃“+”表示的方法，在生產(chǎn)上可起到預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)的作用。“++”出現(xiàn)死魚現(xiàn)象，但這不是絕對(duì)，如果魚體比較瘦弱，有時(shí)“+”也可死魚。如果魚特別健壯，有時(shí)“+++”也不一定死魚，這要看具體情況。
所有的有關(guān)結(jié)果應(yīng)記錄清楚存查。
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